زمینه و هدف: کالپروتکتین، S۱۰۰ A۸ و S۱۰۰ A۹ در فرآیندهای مهمی نظیر پیام رسانی و تنظیم پاسخ های التهابی نقش دارند. در این مطالعه، بیان S۱۰۰ A۸ و S۱۰۰ A۹ بصورت نوترکیب، خالص سازی و بررسی ساختار آنها انجام گردید.

  روش کار: در این مطالعه تجربی از pET۱۵b به عنوان حامل توالی کد کننده ژنهای S۱۰۰ A۸, S۱۰۰ A۹ انسانی و از ( E.coli BL۲۱ (DE۳  به عنوان میزبان استفاده گردید. بیان ژن و فرآیند خالص سازی از طریق SDS-PAGE مورد ارزیابی قرارگرفت. خالص سازی پروتئینها با استفاده از رزین Ni-NTA و بر اساس میل ترکیبی آن به His-Tag پروتئین های نوترکیب انجام گرفت. ساختار سوم پروتئین ها با طیف سنج فلورسانس بررسی شد.

  یافته ها: زیر واحدهای مذکور ۴-۳ ساعت بعد از القاء و دمای ۳۷ درجه سانتی گراد بیان بالایی را نشان دادند. درصد بالایی از پروتئین S۱۰۰A۹ در فاز اینکلوژن بادی نشان داده شد، در حالیکه زیر واحد S۱۰۰A۸ عمدتا بصورت محلول بیان گردید. S۱۰۰A۸ و S۱۰۰A۹ در غلظت mM ۱۰۰ ایمیدازول خالص سازی گردید. در بررسی طیف سنجی نشان داده شد که اسید آمینه تریپتوفان در ساختار های داخلی قرار گرفته و کمتر در معرض محیط آبی است.

  نتیجه گیری: در این مطالعه زیر واحدهای S۱۰۰A۸ و S۱۰۰A۹ بصورت نوترکیب بیان شده و تخلیص گردید. همچنین، ساختار آنها مورد تایید قرار گرفت.